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KD110什么车牌号

    发布时间:2019-07-27

    你指的是样品和Loading混合后水煮3min后的那次离心?那么这和你离心没有关系,这次离心的主要目的是去掉不溶的成份。一般loading中含有SDS,水煮后蛋白都是处于溶解状态,很少有不溶的成份。不溶的也并不是蛋白质,所以电泳取的是上清。而且不溶的这部分也不能进行电泳。如果SDS-PAGE没有目的条带,一般原因有两个,1是你选择的凝胶浓度不对,蛋白已经跑出凝胶了。这种情况你得看你的marker是否有10kD的带出现,marker的10kD的带都没有的话,基本可以确定是跑出去了。这种情况你得增加凝胶浓度,10kD的蛋白属于分子量非常小的蛋白了,跑出去的可能性非常大。然后如果你凝胶浓度没有问题的话,那么你就要看你的蛋白是否表达了。我看你用的是菌液,那么你做的应该是外源蛋白的表达吧,如果是的话,那么应该就是蛋白没有表达。你得检查下你的诱导条件是否有问题,诱导剂是否有问题。此外,如果都没有问题的话,你应该去查下你的片段是否正确插入载体了。

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